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微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒技術(shù)說明書
BS-5182 微生物過氧化物酶(POX)ELISA試劑盒
一、實驗原理
本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)，通過以下步驟實現(xiàn)POX定量檢測：
固相包被：微孔板預(yù)包被抗POX捕獲抗體，形成固相載體。
抗原結(jié)合：待測樣本中的POX與捕獲抗體特異性結(jié)合，形成抗體-抗原復(fù)合物。
酶標(biāo)顯色：加入HRP標(biāo)記的檢測抗體，通過TMB底物顯色反應(yīng)，顏色深淺與POX濃度呈正相關(guān)。
二、試劑盒組成
組分規(guī)格保存條件
預(yù)包被微孔板96孔/板2-8℃(避光)
POX標(biāo)準(zhǔn)品6濃度梯度-20℃
HRP標(biāo)記檢測抗體1瓶4℃(避光)
TMB顯色底物1瓶4℃(避光)
終止液(2M H?SO?)1瓶室溫
三、操作步驟
樣本處理
微生物培養(yǎng)液：離心(10,000g，10min)取上清，避免反復(fù)凍融。
組織勻漿：按1:5比例加入PBS(pH 7.4)勻漿，離心后取上清。
檢測流程
加樣：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃孵育90分鐘.
洗滌：棄液后拍干，重復(fù)洗滌3次(每次300μL PBS-Tween) .
顯色：加入TMB底物100μL，避光反應(yīng)15分鐘，終止后測450nm吸光度.
四、注意事項
試劑保存：TMB底物需避光保存，避免凍融.
交叉污染：移液槍頭需一次性使用，不同樣本間更換槍頭.
數(shù)據(jù)有效性：標(biāo)準(zhǔn)曲線R2需≥0.98，樣本OD值需在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi).
五、技術(shù)參數(shù)
靈敏度：≤0.5 pg/mL(超靈敏型) .
檢測范圍：0.5-2000 pg/mL(線性范圍).
批內(nèi)/批間變異系數(shù)：<10%。
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒
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